PCR潔凈實驗室
PCR實驗指的是基因擴增實驗,其特點是能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,PCR實驗室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,例如:乙型肝炎,禽疫病、艾滋病檢測,癌基因的檢測和診斷,個體識別,DNA指紋,親子鑒定及法醫(yī)物證等。
一、PCR實驗室布局
1、PCR實驗室原則上分為:①試劑準(zhǔn)備區(qū);②樣品制備區(qū);③擴增區(qū);④擴增產(chǎn)物分析區(qū),共四個單獨的工作區(qū)域。并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
2、不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨立的,各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,不能直通,如果緊密連接,需安裝物品傳遞窗。
二、實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備
1、試劑準(zhǔn)備區(qū):
① 主要進行試劑的制備,分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū)域。
② 試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。
③ 本區(qū)主要設(shè)備有冰箱,天平,離心機,加樣器,振蕩器等。
④ 本區(qū)對氣流壓力的控制,并沒有嚴(yán)格的要求,一般為+10Pa。
2、樣品制備區(qū):
① 主要進行樣品的保存,核酸提取,貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定DNA的合成。
② 本區(qū)主要設(shè)備有冰箱,生物安全柜,離心機,加樣器,振蕩器等。
③ 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染,壓力一般設(shè)計為+10Pa。
3、擴增區(qū):
① 主要進行DNA擴增項目。
② 已制備的DNA模板(來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。
③ 本區(qū)主要設(shè)備有:冰箱,加樣器,離心機,擴增儀等。
④ 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,以避免氣溶從本區(qū)漏出,壓力一般設(shè)計為-25Pa。
4、 擴增產(chǎn)物分析區(qū):
① 主要進行擴增產(chǎn)物的測定。
② 本區(qū)主要設(shè)備有加樣器,洗板機、酶標(biāo)儀和水浴箱等。
③ 本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域,壓力一般設(shè)計為-25Pa。